Genvivo：HaloTag蛋白標簽熒光配體

HaloTag的背景及應用：

在生命科學研究中，蛋白質標記是一項關鍵的技術，它能夠幫助科學家們研究蛋白質的功能、相互作用以及定位等重要信息。然而，傳統的蛋白質標記技術往往存在一些限制，如標記物的大小、穩定性和標記效率等方面的問題。幸運的是，隨著科學技術的發展，一種革命性的蛋白質標記技術——HaloTag的出現，為研究人員提供了全新的解決方案。

HaloTag是由Promega公司開發的一種基于蛋白結構域的標記技術，它結合了蛋白結構域的高親和性和化學標記物的靈活性，使其成為一種出色的蛋白質標記工具。

HaloTag標記蛋白質的原理是基于融合蛋白標簽和合成熒光配基之間共價鍵的形成，可用于標記細胞或其他生化環境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag報告基因蛋白是33kDa的單體蛋白，是一種經基因工程改造、無催化活性的水解酶衍生物，在生理條件下可以快速和 HaloTag熒光配體形成不可逆的共價鍵從而實現對目的蛋白的高特異性標記。

HaloTag技術具有許多令人興奮的優勢。首先，HaloTag標記物的小尺寸使其能夠輕松地與目標蛋白質結合，不會對蛋白質的結構和功能產生明顯的影響。其次，HaloTag標記物具有極高的親和力，可以實現高效的蛋白質標記和純化。此外，HaloTag標記物的化學結構多樣性，使得研究人員可以選擇適合自己實驗需求的標記物，如熒光染料、親和樹脂和質譜標記物等。這為蛋白質功能研究、蛋白質相互作用的鑒定以及蛋白質定位提供了更多的可能性。

除了以上的優勢，HaloTag技術還具有操作簡便、高靈敏度和廣泛適用性等特點。它可以用于多種生物樣本，包括細胞系、原代細胞、組織和活體模型等。無論是在基礎研究領域還是在藥物發現和開發中，HaloTag技術都展現出巨大的潛力。

HaloTag的熒光配體：

CA-SiR Ligand是一款以四甲基硅羅丹明為母體的遠紅發射熒光配體，基于其在溶液中無色親酯的內酯結構和標記在HaloTag 蛋白后熒光的兩性離子結構之間的高效轉換，可以實現對目標蛋白的“免洗”標記。

CA-TMR Ligand和 CA-R110 Ligand是以氧羅丹明為母體的熒光配體，二者皆具有良好的熒光亮度、較高的光穩定性、較低的光毒性和較好的細胞膜滲透能力；目前已廣泛應用于寬場、共聚焦、單分子定位示蹤和SIM超分辨成像等多種模態的成像系統中，其較好的生物相容性使其可以應用于哺乳動物細胞、植物、細菌、酵母等生物體系的熒光成像。

相較于CA-TMR Ligand 和CA-R110 Ligand熒光配體，CA-SiR Ligand熒光配體不僅具有良好的熒光亮度、較高的光穩定性和較低的光毒性，其極佳的生物相容性和高效的細胞膜滲透能力，使得CA-SiR Ligand熒光配體在哺乳動物細胞、植物、細菌、酵母和活體模式動物等生物體系中有著廣泛的應用，并可在除寬場、共聚焦、單分子定位示蹤和 SIM 之外的STED超分辨成像體系中進行活細胞熒光成像。

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